在高效液相色谱分析中，基线指的是色谱柱经过流动相冲洗，与流动相达到平衡后，检测器在一定时间内测得的信号曲线。在色谱仪的各项检测条件正常时，基线应当平行于时间轴。然而，在仪器运行过程中，因检测条件的变化，可能导致信号线位置的变化，从而出现基线漂移或不稳定的情况。

引起基线不稳的因素有很多，从外部因素来看，电源电压过低、波动过大或桥路配置电位器接触不良等都可能导致基线不稳定；从内部因素来看，样品处理、温度控制及系统流路清洁等也会影响基线的稳定性。当出现基线不稳的现象时，需及时检修并排除故障，以免影响检测的准确性。

在高效液相色谱分析中，基线不稳定的原因通常与硬件有关，主要可以从以下两个方向进行判断：

01 产品质量问题

仪器本身的电噪声、外部信号的干扰、工作站软件的信号线连接不良等都可能引发基线的规则性波动和突发性波动。这种不稳定性一般可以通过分析基线信号的规律来判断。

02 使用和维护范围内的基线不稳定

流动相流路中的气泡会造成小的规律性波动；色谱柱污染则可能导致基线大幅波动和各种不规则的波峰，检测器的污染同样会引起基线的不稳定。

1.柱温波动

即使是微小的温度变化也会引起基线波动，特别是对示差检测器、电导检测器和灵敏度较低的紫外检测器影响较大。  

解决办法：确保柱子和流动相温度稳定，可在检测器前使用热交换器。

2.流动相不均匀

流动相条件的变化引起的基线漂移往往大于温度引起的漂移。  

解决办法：使用HPLC级的溶剂，确保盐和添加剂的高纯度。在使用前对流动相进行脱气，使用过程中可引入氦气。

3.流通池被污染或有气体 

解决办法：用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有必要，可用1N的硝酸（勿用盐酸）。

4.检测器出口阻塞  

高压可能导致流通池窗口破裂，产生噪音基线。  

解决办法：清除阻塞物或更换管道，参考检测器手册更换流通池窗。

5.流动相配比不当或流速变化

解决办法：调整流动相的配比或流速，定期检查流动相组成和流速。

6.柱平衡慢 

尤其在流动相发生变化时。  

解决办法：用中等强度的溶剂冲洗，在更改流动相时，使用10-20倍新流动相的体积对柱子进行冲洗。

7.流动相污染、变质或低品质溶剂  

解决办法：检查流动相组成，使用高品质的化学试剂及HPLC级溶剂。

8.样品中有强保留物质  

样品中高K值的物质可能以馒头峰的形式被洗脱，导致基线逐渐升高。  

解决办法：使用保护柱，必要时在进样之间或分析过程中定期用强溶剂冲洗柱子。

9.使用循环溶剂但检测器未调整  

解决办法：重新设定基线，当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。

10.检测器未设定在最大吸收波长处 

解决办法：将波长设置为最大吸收波长处。

通过对上述因素的排查和解决，可以有效提高高效液相色谱分析中基线的稳定性，确保检测结果的准确性。

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来源：实验与分析